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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

小鼠胚成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品簡介:

小鼠胚成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:小鼠小腸Cajal間質(zhì)細(xì)胞 兔冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞 鋅指蛋白481抗體 人NK細(xì)胞白血病細(xì)胞;YT Rab5激活蛋白6抗體 小鼠腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞 堿性成纖維細(xì)胞生長因子9抗體 TTA1(人甲狀腺癌細(xì)胞)

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:1401

更新時(shí)間:2025-04-09

產(chǎn)品特性Product characteristics

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!

產(chǎn)品名稱:小鼠胚成纖維細(xì)胞

組織來源:胚胎

產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

小鼠胚成纖維細(xì)胞

培養(yǎng)信息:

小鼠胚成纖維細(xì)胞

培養(yǎng)基:含FBS、bFGF、Insulin、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

傳代特性:可傳3代左右

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

小鼠胚成纖維體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞簡介:

小鼠胚成纖維細(xì)胞

小鼠胚成纖維分離自胚胎;成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的胚胎成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細(xì)胞常用作ES細(xì)胞培養(yǎng)常用的飼養(yǎng)層細(xì)胞,能產(chǎn)生抑制ES細(xì)胞自主分化和促進(jìn)ES細(xì)胞增殖的因子,故能有效地促進(jìn)ES細(xì)胞的增殖并維持其未分化特性和多潛能性,且分泌效果優(yōu)于外源添加的一些因子,而且可以為ES細(xì)胞的培養(yǎng)提供類似于體內(nèi)的微環(huán)境,故在研究哺乳動物ES細(xì)胞中得到廣泛使用。

方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胚成纖維采用消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胚成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

小鼠胚成纖維細(xì)胞


培養(yǎng)步驟:

小鼠胚成纖維細(xì)胞
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a)、對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b)、對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠胚成纖維細(xì)胞

血小板衍化生長因子-AB   英文名稱:   plateler-derived growth factor AB   英文縮寫:   PDGF-AB

血小板衍化生長因子-BB   英文名稱:   plateler-derived growth factor BB   英文縮寫:   PDGF-BB

程序性死亡因子1   英文名稱:   programmed death 1   英文縮寫:   PD1

旁分泌的方式分泌血小板源性生長因子受體β   英文名稱:   Platelet-derived growth factor receptor beta   英文縮寫:   PDGF Rβ

5-三磷酸肌醇受體2抗體

ZIM3蛋白抗體

CD14重組大鼠 CD14 蛋白 Protein

Connexin-43(Cx43 0.5mgConnexin-43(Cx43) 間隙連接蛋白43(多肽片斷抗原)

HNMT重組人 HNMT / Histamine N-methyltransferase 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

CCDC134 Protein Human 重組人 CCDC134 蛋白

CLEC6A Protein Mouse 重組小鼠 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 蛋白

Connexin-43(Cx43 0.5mgConnexin-43(Cx43) 間隙連接蛋白43(多肽片斷抗原)

CCDC134 Protein Human 重組人 CCDC134 蛋白

CD14重組大鼠 CD14 蛋白 Protein

CLEC6A Protein Mouse 重組小鼠 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 蛋白

HNMT重組人 HNMT / Histamine N-methyltransferase 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHC-/H-2ELISA pcr檢測試劑盒

Human ai parietal cell aibody (AGPA/PCA) ELISA Kit 人抗胃壁細(xì)胞抗體(AGPA/PCA)試劑盒

HumanProteoglycan,PGELISAKit 人蛋白聚糖(PG)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforACA-IgGELISAKit大鼠抗心0脂抗體IgG

耶爾森氏菌屬(Yersinia)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增試劑盒20

MouseOsteoprotegerinLigand,OPGLELISAKit小鼠骨保護(hù)素配體(OPGL)試劑盒規(guī)格:96T/48T

小鼠胚成纖維細(xì)胞大鼠蛋酸酶(PP)試劑盒 ,英文名: PP ELISA Kit

Porcine vascular endothelial cell adhesion molecule 1 (VCAM-1/CD106) ELISA Kit 豬血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒

病毒通用型核酸試劑盒(熒光PCR) 48T

CLIAKitforLptn/LTN/XCL1(Humanlymphotactin)ELISAKit人淋巴細(xì)胞趨化因子

通用免疫化學(xué)封閉溶液100毫升

ELISAKitMYO/MB雞肌紅蛋白

收到細(xì)胞如何處理?

小鼠胚成纖維細(xì)胞
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。

2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。

5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作


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